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第五十章 噬菌体的一步生长曲线(2/2)

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焦急万分的付万全正在客栈苦苦等候,他已习惯奶爸的日常,由刚开始怨气满腹变成默默隐忍,心道阿酒长得快,大概没多久就能跑能飞能自己回红果林吧,只要等待就好。他待在客栈把阿酒哄睡,心中牵挂着灵盈的事,本想和刘梦先、周三聊天打发时间,可两人早就不感兴趣的洗洗睡了。对刘梦先而言,皇后就是皇后,皇后只是皇后,其他背后的东西无需去关注理会,只要她还在那个位置上就好。

看到几个人,付万全连连追问道:“事情怎样?灵盈师妹呢?皇后呢?”唐阿生把背着的杆状细菌放到床上,耸耸肩道:“皇后在此。灵盈被小微姐带走了,没回来吗?”付万全还要再问,蕴空道:“付师弟,你先出去。若是看到林小微和灵盈,拦住她们千万莫要进来。”付万全一愣,卫天然解释道:“我们现在要施法测定噬菌体的裂解量,此法属于神秀门独门秘法,外人不得偷窥。付师弟,麻烦你和裴师弟守门,不得让任何人干扰。”

付万全和裴剑浩依言退出。卫天然盘坐在床,蕴空在边上护卫,依卫天然之前所说,唐阿生开始进行双层平板法的操作。双层平板法是神秀门专门用来检测噬菌体侵染宿主产生的具有活力的小噬菌体数量的方法,此法精确简单,效率极高。

唐阿生先分别配制含2%和1%琼脂的底层LB培养基、上层LB培养基以及普通的LB液体培养基,装在多根试管中,之后在超净工作台中将底层培养基倒在平板上凝固。卫天然伸手一抓,被裴剑浩扛回来的男人化形的大肠杆菌逐渐缩小至几乎看不见的小黑点,被投入到一个锥形瓶中。随后,锥形瓶缓缓飞入预先拿出的恒温培养箱中,37度开始培养。在适宜的条件下,大肠杆菌生长繁殖速度极快,通常15-20分钟可繁殖一代,然而要繁殖到卫天然所需数目,仍需要至少十几个小时。

卫天然手掌发出淡淡白光,罩住培养箱,以灵力加速大肠杆菌的生长。不过一盏茶时间,取出锥形瓶,本来清澈的淡黄色培养基已经变得非常浑浊。唐阿生吸取适量大肠杆菌培养液和上层培养基混合,卫天然则取出玉瓶,小噬菌体纷纷从玉瓶中飞出,被白光罩着强行投入上层培养基中。

唐阿生慢慢将加有敏感宿主、噬菌体和上层培养基的锥形瓶摇匀,隔十分钟取一次样,将样品稀释后倒在底层培养基上铺平,置于37度培养,待10小时后进行计数。当然,有灵力加速可以大大节省时间。

时间在等待中流逝,5分钟后,唐阿生取出第一个平板,看到在一层薄薄的大肠杆菌菌苔中,均匀分布了100个具有一定形状、大小、边缘和透明度的透明圆圈。卫天然道:“这是噬菌斑,噬菌体侵染细菌后导致细菌裂解死亡留下的痕迹,根据噬菌斑数目可以判断噬菌体的效价。”

唐阿生哦了一声,忽然想起一个问题:“卫师兄,刚才那个男人化形的大肠杆菌被你缩小投入到培养基中,可还能复活?”卫天然看了他一眼,想起刚上神秀门时唐阿生说的那番话,笑笑道:“万事万物皆有生死定数,身死而后魂灭,若死的有意义,虽死无憾,死与生同也。”

他这番话说的拐弯抹角,唐阿生却仍听出其中含义,呼吸一窒,觉得有点说不出的难受,刚学会双层平板法的欢喜之情也冲淡不少。10分钟,他又取出一个平板,发现噬菌斑仍然只有100个,不觉讶然道:“噬菌斑数目为何毫无变化?”

卫天然忙着给培养箱灌注灵力,无暇旁顾。蕴空道:“阿生,双层平板法不过只是简单的手法,我们的目的是运用这种方法检测烈性噬菌体生长规律的实验曲线-一步生长曲线,从而判断噬菌体的三个重要参数-潜伏期、裂解期和裂解量,这才是重中之重。”

潜伏期-指噬菌体的DNA侵入宿主细胞后到第一个成熟的后代子噬菌体释放前的一段时间。又可分为两段:1)隐晦期-指在潜伏期前期人为用氯仿等裂解宿主细胞后,裂解液仍无侵染性的一段时间,此时细胞正处于复制噬菌体核酸和合成其蛋白质衣壳的阶段;2)胞内累积期-隐晦期后,人为裂解细胞,其裂解液已经呈现侵染性的一段时间,此时细胞内已经开始装配噬菌体粒子。

裂解期-宿主细胞迅速裂解,后代噬菌体急剧增多的一段时间。

平稳期-感染后的宿主细胞已全部裂解,后代噬菌体达到最高点的时期。

用平稳期的噬菌斑数除以潜伏期的噬菌斑数,可以计算出噬菌体侵染每个宿主细胞所释放的子代噬菌体数,即裂解量。

接下来果然如蕴空所言,20分钟后噬菌斑数目迅速增加,大约40分钟后,噬菌斑数目达到21000个,此后不再增加,由此可计算出噬菌体感染大肠杆菌后的裂解量为210个。

卫天然想了想,还有两个小噬菌体逃走不知去向,等日后有空再抓吧。

忙了一夜,到天空微微发白,一切终于结束。唐阿生走出房间,怔怔的看天空由暗到半明半暗,最后一线光明冲出天际,天亮了,街道外来往的人群渐渐增多,客栈的厨房里传来包子、油条和糕点的香味,异界里热闹繁忙普通的一天开始了。

林小微拍拍他的肩膀道:“想什么呢?”林小微陪着灵盈也是一夜未睡,到黎明时分灵盈才沉沉睡去,林小微反而睡不着,干脆起来走走。唐阿生回头笑笑道:“没什么,就是看看。”林小微歪着头围着他转了一圈,笑道:“我发现,自从神庙回来后,阿生好像变得有些深沉了,有心事?”唐阿生摇摇头,甩开莫名的思绪,和林小微一起下楼吃包子。

“皇后如何了?”林小微咬一口热腾腾的肉包子,问道。

“恢复成人形,已无大碍。”唐阿生道。林小微松了口气,万幸。两人默默吃着包子,没多久,晨起练完功的周三、刚睡醒的刘梦先、付万全和灵盈都坐过来。

裴剑浩下楼道:“灵盈师妹,蕴空师姐让我转告你,皇后已经大好,回宫去了,你若记挂,现在就可回宫看望。”灵盈嗯了一声,颇有些无精打采,林小微轻轻握住她的手道:“回宫后,千万莫要对皇后谈起昨晚之事,更莫追问从前。过去的已经过去,只要皇后安好,足矣。”灵盈双眸泪光闪动,点点头道:“谢谢你,小微姐。”

灵盈回到宫中,欲见皇后,却首次被侍女阻拦,道皇后身体不适,让改日再来,灵盈闷闷不乐的走了。

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